vip-payday.co.uk
Área de Laboratorío

Área de Laboratorío

Homeoestímulos inocuos, no tóxicos que estimulan la curación. No inhiben ni interfieren las respuestas curativas, estimulan la capacidad de auto curación (vis medicatrix naturae).

More...
Consagración y Servicio

Consagración y Servicio

La Farmacia Médica Homeopática SER HUMANO tiene más de 2 lustros de estar consagrados a  brindar salud natural.

More...
Galardon 2013

Galardon 2013

La farmacia médica homeopática SER HUMANO, le participa a su honorable grupo de clientes y amigos que nos hemos hecho merecedores, del Galardón ISQL 2 013.

More...
Premios Ser Humano

Premios Ser Humano

Premio Internacional a la  Excelencia "Excellence Awards Institute 2.008". Membrecia de Honor " Cambridge International University 2007".

More...
Frontpage Slideshow | Copyright © 2006-2010 JoomlaWorks, a business unit of Nuevvo Webware Ltd.

INVESTIGACION CLINICA: Streptococcus mitis

 

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL.ESCUELA NACIONAL DE MEDICINA Y HOMEOPATÍA.
SECCIÓN DE ESTUDIOS DE POSTGRADO E INVESTIGACIÓN.
ESPECIALIZACIÓN EN TERAPÉUTICA HOMEOPÁTICA OPCIÓN ODONTOLOGÍA

 


 

 

Efecto antimicrobiano “in vitro” de la tintura de Árnica montana y Caléndula officinalis sobre Streptococcus mitis.

 

AUTORES
C. D. Francisco Fernando Baños Román*, C. D. Ma. Ernestina Moctezuma Lechuga**, C. D. José M. Delgado Ruiz***, Q. B. P. José Tomas Hernández Méndez****.

 

*Tesista, Egresado de la Especialización en Terapéutica Homeopática, opción Odontología ** Docente e Investigador de la ENMyH.*** Docente e Investigador de la ENMyH., Becario EDD y SIBE COFAA **** Docente e Investigador de la ENCB.
Guillermo Massieu Helguera N° 239 Fracc. “La Escalera”, Ticomán, D. F., C. P. 07320/ Teléfono: 57 29 60 00 Ext. 55544 y 55 86 31 03
Efecto antimicrobiano “in
   vitro” de la tintura de Árnica montana y Caléndula officinalis sobre Streptococcus mitis.
*Baños Román Francisco Fernando, **Moctezuma Lechuga Maria Ernestina,*** Delgado Ruiz José M., ****Hernández Méndez José Tomas

 

 

RESUMEN
Como sabemos, la placa dentobacteriana (PDB) conduce diversos microorganismos que son factores predisponentes de diversas patologías bucales como la enfermedad periodontal y la caries, esta última relacionada con el aumento de estreptococos principalmente Streptococcus mitis.

La terapéutica homeopática en odontología hasta el día de hoy es terreno fértil en investigación ya que existen pocas y de estas, algunas, aplicadas en forma alopática. Con respecto a la terapéutica homeopática existen diversos remedios que inhiben algunos microorganismos, de entre ellos se eligió a Árnica montana y Caléndula officinalis debido a que sus principios activos tienen propiedades bactericidas.

Este trabajo forma parte del Proyecto de Investigación Estudio “in vitro” de la Acción de los Medicamentos Homeopáticos en la Placa Dentobacteriana, clave CGPI 20010119.

La investigación es prospectiva, longitudinal, comparativa y experimental. Se estudian “in vitro” las cepas de Enterococcus faecalis, Escherichia coli ATCC 25922; Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853; Staphylococcus aureus ATCC 25923; Streptococcus mutans G536; Streptococcus mutans LRA, Streptococcus mitis; Streptococcus sanguis. Además se contrastan en medios de cultivo Mueller Hinton con sangre de carnero desfibrinada con tinturas y diluciones homeopáticas a 1:2; 1:4, 1:8; 1:16, 1:32, 1:64; 1:128, también se sustituye en los medios de cultivo el agua por medicamento homeopático administrado en la forma antes descrita. Asimismo se realizan pruebas en sensidiscos impregnados con: Árnica montana; Avena sativa; Caléndula officinalis; Echinacea angustifolia; Rumex crispus y Sepia officinalis. El medio de cultivo con Árnica montana en tintura y en diluciones 1:2; 1:4, 1:8 muestra inhibición y no así las diluciones 1:16, 1:32, 1:64; 1:128. El sensidisco impregnado con tintura de Árnica montana muestra un halo de 2 cm; el de Caléndula officinalis indica un halo de 1cm, al igual que el testigo de alcohol de 87°. El resto de los medicamentos en ambas pruebas mostraron crecimiento bacteriano.

*Tesista, Egresado de la Especialización en Terapéutica Homeopática, opción Odontología / ** Docente e Investigador de la ENMyH. / *** Docente e Investigador de la ENMyH., Becario EDD y SIBE COFAA / **** Docente e Investigador de la ENCB.

 

INTRODUCCIÓN
Más de 300 años después de que Anthony Van Leeuwenhoek observara los 'animalucos' extraídos de las limaduras dentales, hoy todavía se intenta descifrar la estructura y actividad biológica de las bacterias asociadas con la dentición humana[i]. Durante el siglo XIX y principios del siglo XX existieron varias teorías respecto a la etiología de la caries y enfermedad periodontal, entre estas se encuentra la del médico Británico William Hunter, quien fue el primero en describir la conexión entre la sepsis oral y las infecciones de sitios distantes lo que origino la teoría de la infección focal. Las infecciones focales son infecciones que se localizan en diferentes partes del cuerpo humano y son causadas por microorganismos (o sus productos) que habitan en la cavidad oral, siendo el foco responsable del inicio y de progresión de varias enfermedades como la artritis, úlcera péptica y apendicitis [ii], [iii], [iv]. Para vislumbrar el crecimiento bacteriano debemos comenzar por el desarrollo bacteriano en el ser humano, este da inicio 8 horas después del parto, en el cual el recuento bacteriano se incrementa de forma rápida. La flora microbiana en esta etapa consiste en lactobacilos, estreptococos, Staphylococcus, Enterococcus, Veillonellae, Neisseria y coliformes. A pesar de que la composición bacteriana de la flora oral varía durante los primeros días de vida, los estreptococos con regularidad son los primeros habitantes en la cavidad oral. Estos predominan en un 70% de la cuenta bacteriana viable, durante la niñez y la adolescencia. Las bacterias se incrementan hasta la edad adulta, en la cual varían un poco y se asocian con varias enfermedades incluyendo la enfermedad periodontal y la caries. Esto se debe a que la placa dental o placa dentobacteriana, que es una acumulación heterogénea se adhiere a los dientes o se sitúa en el espacio gingivodental, esta compuesta por una comunidad microbiana rica en bacterias aerobias y anaerobias, rodeadas por una matriz intercelular de polímeros de origen microbiano y salival [v]. De esta comunidad el grupo de Estreptococos orales o viridans incluye a los grupos: Streptococcus mutans y Streptococcus oralis, este último incluye al Streptococcus mitis, que es una bacteria comensal de la cavidad oral y nasal, son cocos gram + esféricos o elipsoides que forman largas cadenas y producen ácido a partir de la fermentación de la glucosa, maltosa, la sacarosa y a veces la lactosa pero del manitol, la inuliona, el sorbitol, el glicerol y la xilosa[vi]. Se han descrito dos biotipos. El biotipo 1 coloniza la mucosa de la cavidad bucal y forma parte inicial de la placa cariogénica de superficies libres, el biotipo 2 se localiza en el dorso de la lengua. El Streptococcus mitis se asocia con enfermedades sistémicas, incluyendo la endocarditis infecciosa, bacteremia y neumonía[vii]. Los estreptococos orales son de mayor importancia debido a que estas bacterias son patógenos significativos en pacientes inmuno-comprometidos y en los neonatos.[viii]

El grupo de Streptococcus mutans fue descrito por Clarke en 1924, a partir de caries de dentina. Por lo regular se aísla de todos los individuos, siempre y cuando sean dentados o indemnes a la caries. Su primer hábitat es la superficie dentaria del hombre, pero también se pueden identificar en las fauces. Su presencia en la placa bacteriana se ve favorecida por una alta ingesta de sacarosa en la dieta.

La incidencia del S. mutans en la etiología de la caries dental ha sido demostrada en lesiones cariosas después de su introducción en la cavidad oral de animales libres de gérmenes.[ix] Con la pérdida dental algunas cepas de estreptococos se reducen. En pacientes edentulos, sin dentaduras artificiales, algunas especies de estreptococos se reducen o en forma virtual se eliminan, a pesar de elevarse un poco en niveles pre-extracción dental y después de la colocación de dentaduras[x].

MATERIALES
Estufa de incubación, asa de siembra, balanza, autoclave, material de laboratorio, hisopos estériles.

MEDIOS DE CULTIVO: Caldo Mueller Hinton (CMH); Gelosa Mueller Hinton con sangre de carnero desfibrinada (MHS);Gelosa Mueller Hinton con sangre de carnero desfibrinada con medicamento homeopático (MHScMH). CEPAS: Enterococcus faecalis, Escherichia coli ATCC 25922; Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853; Staphylococcus aureus ATCC 25923; Streptococcus mutans G536; Streptococcus mutans LRA, Streptococcus mitis; Streptococcus sanguis. SENSIDISCOS: Alcohol de 87° (Testigo); alcohol de 90° (Testigo). TINTURAS: Árnica montana; Avena sativa; Caléndula officinalis; Echinacea angustifolia; Rumex crispus; Sepia officinalis. Aguja de disección, pinzas de curación; cajas de Petri de vidrio de 60 mm de diámetro; micropipeta con capacidad de 20 µL.; puntas desechables para micropipeta; discos de papel filtro Whatman 2 de 6 mm de diámetro; cinta testigo.

METODOS

Utilizando Gelosa Mueller Hinton con Sangre de Carnero Desfibrinada, Gelosa Mueller Hinton con Sangre de Carnero Desfibrinada con Medicamento Homeopático (mhscmh), el procedimiento fue:

Limpiar el campo de trabajo, pesar el agar según las especificaciones del fabricante. Medir el agua. Dejar hidratar el agar. Calentar el agar en el mechero, hasta su disolución. Hervir por un minuto. Tapar. Esterilizar en el autoclave a 121° C, durante 15 minutos. Dejar que baje la presión a 0, dejar enfriar en 50° C. Agregar 5ml de sangre por cada 100 ml de cultivo y mezclar. Vaciar la gelosa en las cajas de Petri, con cuidado hasta que ambos extremos se unan. Tapar el medio de cultivo. Dejar gelificar, rotular con las iniciales del medio de cultivo. Someter a prueba de esterilidad incubando los medios a 37° C durante 24 horas. Refrigerar hasta su uso.

Para los medios con medicamento homeopático sustituir el agua por tintura y diluciones de medicamento homeopático con una relación de agua-medicamento de: 1:2; 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64; 1:128.

PREPARACIÓN DE LOS SENSIDISCOS

Limpiar y desinfectar el campo de trabajo; colocar los sensidiscos en la caja de Petri con ayuda de la aguja de disección y las pinzas de curación. Tapar los bordes de la caja con cinta testigo, esterilizar en el autoclave a 121°C, durante 15 minutos. Colocar los discos a 37°C durante 24 horas. Colocar en cada disco 10 µL del medicamento homeopático. Seguir el mismo procedimiento para todos los medicamentos. Dejar secar los sensidiscos por espacio de 3 a 4 horas en la estufa. Mantener los disco a temperatura ambiente hasta su uso.

PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD

PREPARACIÓN DEL INOCULO: Inocular en un tubo con CMH una asada de la cepa. Incubar a 37°C hasta que alcance la turbiedad equivalente al tubo 0.5 del nefelómetro de McFarland.

SIEMBRA DEL INOCULO: Introducir un hisopo estéril en el tubo con la cepa estandarizada, exprimir el hisopo presionando en las paredes del tubo. Sembrar masivamente en [MHS] y (MHScMH) (Figura 1); dejar secar. En la caja de MHS colocar lo sensidiscos con las pinzas de curación y aguja de disección, rotular la base de la caja con un número para identificar que medicamento es (Figura 2 ).

TABLA_CIRCULOS

RESULTADOS

DETERMINACIÓN DE LA DILUCIÓN MINIMA INHIBITORIA EN MHS

En la caja con tintura de Árnica montana y diluciones a 1:2; 1:4 y 1:8 se observó inhibición de Streptococcus mitis, no así en las diluciones 1:16; 1:32; 1:64; 1:128.

DETERMINACIÓN DE LA SUSCEPTIBILIDAD CON SENSIDISCOS, EN MHSCMH.

Streptococcus mitis frente a Árnica montana mostró un halo de 2cm, Caléndula officinalis y el alcohol de 87° expusieron un halo de 1cm. El resto de las tinturas estudiadas no tuvieron ningún efecto sobre las cepas trabajadas.

 

                    Tintura

Resultado

 

1. Tintura Caléndula off.

Halo de 1cm

2. Tintura Árnica montana

Halo de 2cm.

3. Tintura Avena sativa

Creció

4. Tintura Echinacea a.

Creció

5. Alcohol de 90° (Testigo)

Creció

6. Tintura Rumex crispus

Creció.

7. Alcohol de 87° (Testigo)

Halo de 1 cm.

8. Tintura Sepia off.

Creció

 

DISCUSIÓN

El uso tradicional que se le ha dado a Árnica montana es como antiinflamatorio[1], [2], [3], analgésico[4], antibacteriano[5], [6], antimicótico[7], antiviral17, regenerador de tejido17, [8] entre otras propiedades.

Para que un estudio etnobotánico - farmacológico “in vitro” sea eficaz debe iniciar desde el potencial antibacteriano y antimicótico de los principios puros de las plantas (principios activos) o con los extractos crudos (tinturas)[9]. En ambos se utiliza una prueba para determinar la susceptibilidad antimicrobiana en las pruebas de dilución y en discos o en difusión en agar. En la actualidad en odontología no se han realizado suficientes estudios “in vitro” sobre Árnica montana contra microorganismos de la placa dentobacteriana17.

La actividad antimicrobiana “in vitro” de Árnica montana no se ha investigado en forma amplia. Por lo tanto se decidió evaluar su actividad antimicrobiana “in vitro”, no se realizó de forma comparativa con antibióticos porque se desconoce la molécula responsable del fenómeno de la formación del halo, por lo que no se puede saber la concentración de dicha molécula, por lo tanto no se puede establecer una concentración mínima inhibitoria (MIC), ni la potencia de dicha molécula.

La literatura menciona un reporte sobre la actividad antimicrobiana “in vitro” de árnica montana17.En dicho reporte se utilizan varias cepas entre ellas se incluyen: Staphylococcus aureus ATCC 25923; Streptococcus mutans Ingbritt 1600; Streptococcus mutans OMZ 175.

En el presente estudio se utilizan las cepas de Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Streptococcus mutans G536, Lactobacillus acidophilus, Streptococcus mitis, Streptococcus mutans LRA, Enterococcus faecalis; comparando ambos estudios, se determina que el primero 17 esta enfocado hacia microorganismos del periodonto, mientras que el presente estudio se enfoca hacia microorganismos de la placa dentobacteriana.

Comparando la actividad antimicrobiana de ambos estudios en el primer estudio los grupo control y el grupo de árnica montana no muestran inhibición en ninguna de las cepas estudiadas. En el presente estudio la dilución mínima bactericida de Árnica montana mostró resultados favorables en forma de tintura y en las diluciones 1:2 y 1:4 contra Streptococcus mitis. La determinación de la susceptibilidad con sensidiscos, Streptococcus mitis versus Árnica montana mostró un halo de 2cm. Caléndula officinalis y el alcohol de 87° mostraron un halo de 1cm contra Streptococcus mitis.

CONCLUSIONES

Se concluye que de los medicamentos estudiados “in vitro” solo Árnica montana y Caléndula officinalis mostraron eficacia. Conjuntamente es necesario que se realicen más investigaciones con más medicamentos y especies de cepas. Asimismo deben hacerse estudios “in vitro” al mismo tiempo con estudios “in vivo” y clínicos.

 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS


[1] KlaasCA. Wagner G, Laufer S, Sosa S, Della Logia R, Bomme U, Pahl HL, Merfort I. Studies on the anti-inflammatory activity of phytopharmaceuticals prepared from Árnica flowers. Planta Med. 2002. May; 68(5):385-91.

[2] Knuesel O, Weber M, Suter A. Árnica montana gel in osteoarthritis of the knee: an open, multicenter clinical trial. Adv Ther. 2002 Sep-Oct; 19(5):209-18.

[3] Oberbaum M, Schreiber R, Rosenthal C, Itzchaki M. Homeopathic treatment in emergency medicine: a case series.Homeopathy. 2003. Jan; 92(1): 44-7.

[4] Jeffrey SL, Belcher HJ. Use of Arnica to relieve pain after carpal tunnel release surgery. Altern Ther Health Med. 2002. Mar-Apr; 8(2): 66-8.

[5] Lauk L, Lo Bue AM, Milazzo I, Rapisarda A, Blandino G. Antibacterial activity of medicinal plants extracts against periodontophatic bacteria. Phytother Res. 2003 Jun; 17(6): 599-604.

[6] Schmidt TJ, Brun R, Willuhn G, Klaid SA. Anti-trypanosomal activity of helanin and some structurally related sesquiterpene lactones. Planta Med. 2002 Aug; 68(8):750-1.

[7] Koo H, Gomes BP, Rosalen PL, Ambrosano GM, Park YK, Cury JA. “in vitro” antimicrobial activity of propolis and Árnica montana against oral pathogens. Arch Oral Biol 2000 Feb; 45:141-8.

[8] Alonso D, Lazarus MC, Baumann L. Effects of topical arnica gel on post laser treatment bruises. Dermatol Surg. 2002 Aug; 28(8): 686-8.

[9] Cowan Marjorie Murphy. Plant products as antimicrobial agents. Clinical Microbiology Reviews. 1999; 12(4): 564-582.

[10] Schuster George S. Oral flora and pathogenic organisms. Infectious Disease Clinics of North America. 1999; 13(4): 757-774.

[11] KlaasCA. Wagner G, Laufer S, Sosa S, Della Logia R, Bomme U, Pahl HL, Merfort I. Studies on the anti-inflammatory activity of phytopharmaceuticals prepared from Árnica flowers. Planta Med. 2002. May; 68(5):385-91.

[12] Knuesel O, Weber M, Suter A. Árnica montana gel in osteoarthritis of the knee: an open, multicenter clinical trial. Adv Ther. 2002 Sep-Oct; 19(5):209-18.

[13] Oberbaum M, Schreiber R, Rosenthal C, Itzchaki M. Homeopathic treatment in emergency medicine: a case series.Homeopathy. 2003. Jan; 92(1): 44-7.

[14] Jeffrey SL, Belcher HJ. Use of Arnica to relieve pain after carpal tunnel release surgery. Altern Ther Health Med. 2002. Mar-Apr; 8(2): 66-8.

[15] Lauk L, Lo Bue AM, Milazzo I, Rapisarda A, Blandino G. Antibacterial activity of medicinal plants extracts against periodontophatic bacteria. Phytother Res. 2003 Jun; 17(6): 599-604.

[16] Schmidt TJ, Brun R, Willuhn G, Klaid SA. Anti-trypanosomal activity of helanin and some structurally related sesquiterpene lactones. Planta Med. 2002 Aug; 68(8):750-1.

[17] Koo H, Gomes BP, Rosalen PL, Ambrosano GM, Park YK, Cury JA. “in vitro” antimicrobial activity of propolis and Árnica montana against oral pathogens. Arch Oral Biol 2000 Feb; 45:141-8.

[18] Alonso D, Lazarus MC, Baumann L. Effects of topical arnica gel on post laser treatment bruises. Dermatol Surg. 2002 Aug; 28(8): 686-8.

[19] Cowan Marjorie Murphy. Plant products as antimicrobial agents. Clinical Microbiology Reviews. 1999; 12(4): 564-582.

 

 

 

 

 

 

 

 



Nuestros Productos

Please update your Flash Player to view content.

Literatura

Please update your Flash Player to view content.
Sede Barranquilla
Calle 75 No. 44 - 49
Teléfono: (5) 358 91 24 - (5) 301 13 32 - Fax: (5) 358 91 24
Email: farmacia_homeopatica@serhumano.com.co
Sede Sincelejo
Calle 22 -No 13 D- 51 Avenida santander
Tel: 2741945 cel:3007628642
Email: farmaciasincelejo@serhumano.com.co

Diseno Web Balacot